在分子生物學研究領域中, 以分光光度計來定量化核酸或是蛋白質, 算是蠻常用到的量測。
 
市面上有很多種分光光度計, 其中以微量分光光度計(micro-volume spectrophotometer)這樣的種類是比較受歡迎的, 主要的好處是只需一點點的樣品體積, 即可完成量測。而且清潔問題也比使用石英管(cuvette)來得方便, 所以NanoDrop的出現, 對生物研究領域來說真的是非常棒的設計。
 
NanoDrop的微量分光光度計, 在量測方法上有個盲點。它是使用量測兩個不同光路徑長(Optical path-length)的穿透率(transmittance)數值, 去推測出石英管厚度的穿透率。因此, 最後所求, 受到兩次量測誤差的總合影響。另一方面, 由於採用氣體光源, 很容易受到溫度影響, 也就是量測次數愈多,愈需要重新reblank, 否則量測數值會愈來愈不準。這樣的設計方式, 對於儀器的精準度來說, 是比較不利的。
 
 
 
 
光路徑長實際上
 
 
 
             123  
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
若改為使用單一光路徑長, 搭配出貨前即以reference solution的量測結果來建立database, 使用者只要量測一種光路徑長的數據, 來擬合出所求。這樣不僅量測較方便, 在機構上也可以使用一剛體頂Pin來固定光路徑長, 比起兩個光路徑長的設計還要常常做長度校正, 方便許多。
由於database建立時, 可取多次reference solution數值, 再藉由統計方式, 訂出其一光路徑長的數值, 只要一數值點的變異可做到最小, 即使另一點量測上出現最大變異, 最後所求的變異量仍較量測兩個光路徑長方式還要小。
這樣設計的好處, 除非受到重大撞擊, 否則不需針對光路徑長度做校正的動作。
 
 
有網站也討論過, 兩種光路徑長的GR&R比較, 從數據來看的確也是單一光路徑長的機器GR&R數值較佳。
不過目前市面上單一光路徑長的產品不多, 僅看到兩家有這樣的設計而已。
 
 
 
實際上2  
 
 
               
                    
創作者介紹

Bear 180的部落格

Bear180 發表在 痞客邦 PIXNET 留言(1) 人氣()


留言列表 (1)

發表留言
  • monicagoetz
  • 我真的覺得我腦殘~
    我不會放棄
    我會繼續努力瞭解你這篇文章
    我發誓
  • 別這麼說
    我在跨入此產業前也肯定看不懂

    Bear180 於 2013/05/02 11:07 回覆